SONDAS DE FISH CITOGEM

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Em citogenética molecular essa técnica utiliza sondas de DNA que se hibridam a cromossomos inteiros, centrômeros, telômeros ou a cópia de genes de sequência única e serve como uma poderosa ferramenta auxiliar à citogenética clássica.
 
Esse método tornou-se assim uma ferramenta útil no campo médico e em pesquisa básica, oferecendo novas possibilidades em diagnósticos rápidos e preliminares.
Apresenta muitas vantagens sobre os métodos de hibridação in situ, como alta sensibilidade e especificidade, obtenção de resultados rápidos, estabilidade da sonda e mapeamento direto. Finalmente, a hibridação abre perspectivas interessantes no estudo da organização e estrutura cromossômica.
 
A aplicação da hibridação “in situ” por fluorescência para identificação de cromossomos inclui:
 
. localização de genes ou fragmentos de DNA pertencentes a uma dada região
cromossômica;
. rápida identificação de cromossomos humanos específicos em híbridos de células
somáticas;
. identificação de cromossomos marcadores em metáfases, ajudando e
complementando a análise citogenética;
. mapeamento de genes em pesquisa genômica;
. identificação de rearranjos simples ou complexos e trocas ou quebras
cromossômicas devidos a agentes mutagênicos, como, por exemplo, em estudos de
dosimetria de radiações.
 
Desta forma, este método pode ser usado para marcar regiões para detecção e análise de aneuploidias cromossômicas, análise de aberrações cromossômicas estruturais e mapeamento cromossômico.
 
VANTAGENS DA TÉCNICA DE FISH
 
. Os sinais são localizados com maior precisão.
. Permite a contagem de sinais específicos.
. Os métodos são mais rápidos.
. Visualização dos sinais em intérfase.
. Rápida detecção e diagnóstico de aneuploidias.
. As sondas são mais estáveis do que as sondas marcadas com radioisótopos.
. Podem ser usados diferentes sistemas repórter/detecção, permitindo a análise de várias sondas simultaneamente (multicores).
. Uma série de amplificações com anticorpos específicos pode ser aplicada para aumentar a sensibilidade das sondas marcadas indiretamente e facilitar a visualização do sinal.


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